Ksantoproteinovaya reaksyon sa protina: mga ilhanan ug mga pormula talaid

Aron sa paglig-on ang hiyas nga komposisyon sa daghang pagkaon nga gigamit ksantoproteinovaya reaksyon sa protina. Ang presensya sa humot nga amino mga asido sa mix mausab diha sa usa ka positibo nga kolor test sample.

Unsa ang protina

Kini gitawag usab sa usa ka protina, nga mao ang usa ka building nga materyal alang sa mga buhi nga lawas. Protina sa pagpadayon sa kaunoran gidak-on, sa pagpahiuli sa samdan ug patay tisyu istruktura sa nagkalain-laing mga organo, nga kini buhok, panit ug sa kaugatan. Uban sa ilang partisipasyon, og pula nga dugo corpuscles, gidumala sa normal nga operasyon sa daghang mga hormone ug immune system sa mga selula.

Kini mao ang usa ka komplikado nga molekula nga mao ang usa ka polypeptide nga may usa ka masa nga mas dako pa kay sa 6 ~ 10 ³ daltons. Protina nga gambalay pagtukod amino acid residues sa usa ka dako nga gidaghanon sa mga inubanan peptide bugkos.

Ang istruktura sa protina

Ang talagsaon nga bahin sa niini nga mga butang kon itandi sa ubos nga molecular gibug-aton mga peptide mao nga sila og usa ka tulo-ka-dimensional spatial nga gambalay, gisuportahan epekto uban sa lainlaig degrees sa atraksyon. Protina sa pagpanag-iya sa upat ka-gambalay. Kay ang matag usa kanila adunay iyang kaugalingon nga mga kinaiya.

Ingon nga ang mga basehan sa mga nag-unang organisasyon sa mga molekula nga nakuha amino acid ay, gambalay nga ila ksantoproteinovaya reaksyon sa protina. nga gambalay Kini mao ang usa ka matag balik-balik nga peptide bugkos -HN-CH-bangonon, usa ka pinili nga bahin radicals mao ang mga kilid ug mga talikala diha amino mga asido. Sila nagpaila sa dugang kabtangan sa mga bahandi nga ingon sa usa ka bug-os nga.

Ang nag-unang protina nga gambalay giisip nga lig-on nga igo na, kini mao ang tungod sa presensya sa lig-on nga covalent inter-aksyon sa peptide talikala. Ang pagporma sa sunod-sunod nga ang-ang mahitabo depende sa mga hiyas sa sa sa inisyal nga yugto.

Ang pagporma sa mga secondary gambalay mao ang posible nga tungod sa paglubag sa amino acid ay sa usa ka tuliyok, diin hydrogen talikala gitukod sa taliwala sa mga puli.

Tertiary level organisasyon sa mga molekula umol pinaagi sa paggamit sa usa sa sa usa ka tuliyok sa ubang mga tipik sa mga panghitabo sa tanan nga posible nga koneksyon sa taliwala kanila, uban sa hydrogen, disulfide, covalent o ionic compound. Ang resulta mao ang sa asosasyon sa porma sa gagmitoyng mga grano.

Ang spatial kahikayan sa tertiary mga gambalay uban sa pagporma sa kemikal nga mga bugkos sa taliwala kanila mosangpot ngadto sa pagporma sa katapusan nga porma sa molekula o quaternary nga lebel.

amino mga asido

hinungdan sila sa kemikal nga kabtangan sa protina. Adunay mga 20 ka mayor nga amino mga asido sa paghimo sa mga polypeptides sa usa ka lain-laing mga han-ay. Kini usab mao ang gihisgotan talagsaon aminocarboxylic acid sa porma hydroxyproline ug hydroxylysine nakuha nag-unang mga peptide.

Ingon sa usa ka ilhanan sa protina reaksyon pag-ila ksantoproteinovaya, sa atubangan sa pipila ka amino mga asido naghatag sa kolor kausaban sa reagents, nga nagpasabot sa presensya sa piho nga mga istruktura sa ilang komposisyon.

Ingon nga kini nahimo, sila carboxylic asido nga nahitabo ilis sa hydrogen atomo sa amino grupo.

Usa ka panig-ingnan nga gambalay sa molekula mahimong mag-alagad sa usa ka structural pormula glycine (HNH- HCH- COOH) ingon nga ang mga simple amino acid.

Sa kini nga kaso sa usa sa mga hydrogens CH ₂ - mahimong pulihan sa usa ka carbon na radikal nga naglangkob sa usa ka benzene singsing, amino, sulfo, carboxy.

Unsa ang ksantoproteinovaya reaksyon

Kay qualitative pagtuki sa mga protina sa paggamit sa nagkalain-laing mga teknik. Kini naglakip sa mga reaksyon:

• biuret uban sa sa dagway sa violet nga kolor;
• ninhydrin sa pagporma sa usa ka asul nga-bayolet solusyon;
• formaldehyde uban sa pagtukod sa usa ka pula nga kolor;
• Nogier sa precipitate sa gray-itom nga kolor.

Sa pagtuman sa matag pamaagi napamatud sa atubangan sa protina ug sa atubangan sa pipila ka mga operatiba nga mga grupo sa ilang mga molekula.

Adunay ksantoproteinovaya reaksyon sa protina. Kini gitawag usab sa pagkahugno Mulder. Kini nagtumong sa mga reaksiyon sa kolor alang sa protina, nga adunay mga humot ug heterocyclic amino mga asido.

Usa ka bahin sa maong usa ka sample nga proseso mao ang nitration acid sa nitriko cyclic amino acid residues sa partikular nga sa paglingkod sa trono sa nitro grupo sa benzene singsing.

Ang resulta sa niini nga proseso mao ang pagtukod sa nitro compounds, nga precipitated. Kini mao ang nag-unang mga bahin ksantoproteinovaya reaksyon.

Unsay determinado sa amino acid

Dili ang tanan aminocarboxylic acid mahimong mamatikdan sa paggamit sa ingon nga sa usa sample. Ang nag-unang bahin sa reaksyon ksantoproteinovaya protina detection - sa atubangan sa mga benzene singsing o heterocyclic singsing sa molekula amino mga asido.

Tungod kay ang mga protina nga nahimulag gikan sa aminocarboxylic asido sa duha ka humot, diin adunay usa ka phenyl grupo (alang sa phenylalanine), ug ang usa ka hydroxyphenyl makihilabihan (sa tyrosine).

Uban sa ksantoproteinovaya reaksyon determinado heterocyclic amino acid tryptophan, indole nga may usa ka humot nga nucleus. Sa atubangan sa mga compounds sa ibabaw sa protina naghatag sa kinaiya kolor kausaban sa pagsulay palibot.

Unsa nga paggamit reagents

Kay pagtuman sa reaksiyon ksantoproteinovaya kinahanglan sa pag-andam sa usa ka 1% nga solusyon sa itlog protina, o utanon gigikanan.

Kasagaran gigamit itlog, nga nabahin alang sa dugang nga panagbulag sa mga protina nga gikan sa yolk. Kay sa usa ka 1% nga solusyon sa protina nga lasaw sa napulo ka pilo nga kantidad sa gihinloan tubig. Human sa pagkabungkag sa mga resulta nga liquid protina kinahanglan nga sinala pinaagi sa pipila ka mga sapaw, mga haklap sa cheesecloth. Kini nga solusyon kinahanglan nga gitipigan sa usa ka mabugnaw nga dapit.

Kini mao ang posible nga sa pagtuman sa reaksiyon sa usa ka utanon protina. Aron sa pag-andam sa solusyon gigamit sa trigo nga harina sa usa ka kantidad sa 0.04 kg. 0,16 l sa gihinloan tubig. Ang mga sagol nga sinaktan sa usa ka tibod nga gihigot sa 24 ka oras sa usa ka mabugnaw nga dapit sa usa ka temperatura sa mahitungod sa + 1 ° C. Sa katapusan sa adlaw ang solusyon naukay, gisundan sa filtration niini una sa gapas balhibo sa carnero ug unya - sa usa ka papel nga gipilo filter. Ang resulta liquid gitipigan sa usa ka mabugnaw nga dapit. Kini nga solusyon mao ang nag-una karon sa albumin tipik.

Kay pagtuman sa reaksiyon ksantoproteinovaya ingon nga ang mga nag-unang reagent gigamit nitric acid conc. Dugang pa reagents mao ang usa ka solusyon sa 10% sodium hydroxide o ammonia, sa gelatin solusyon ug unconcentrated phenol.

Ang pamaagi sa mga

Sa usa ka limpyo nga tube gihimo sa 1% nga protina nga solusyon -th itlog o nga harina sa usa ka kantidad sa 2 ml. Sa niini nga gidugang sa mga 9 tulo sa tingub nitric acid sa flocculation mihunong. Ang resulta sagol nga naandan nga kainit, nga miresulta yellow nga precipitate sa hinay-hinay mahanaw ug kolor niini moadto ngadto sa solusyon.

Sa diha nga ang liquid cools sa sa tube sa daplin sa kuta dugang mahitungod sa 9 tulo sa sodium hydroxide, tingub, nga mao ang sobra alang sa proseso. Ang reaksyon medium mahimong alkaline. Content mahimong orange nga kolor sa test tube.

bahin sa

Tungod kay ksantoproteinovaya gitawag qualitative reaksiyon sa nitric acid pinaagi sa buhat sa mga protina, ang sampol nga gihimo ubos sa naglakip fume hood. Pagtuman sa tanang panagana sa kaluwasan sa diha nga nagtrabaho uban sa tingub caustic nga mga butang.

Ang pagpagawas sa mga sulod nga gikan sa tube mahimong mahitabo sa panahon sa proseso sa pagpainit nga kinahanglan nga giisip nga sa diha nga nag-ayo kini sa usa ka tighupot sa ug sa pagpili sa kiling.

Dialing sa tingub nitric acid ug caustic soda kinahanglan lamang sa paggamit sa usa ka baso pipette ug mga pears rubber gidili pipette pinaagi sa baba.

Paryente reaksyon sa phenol

Alang sa pagklaro, proseso ug pagpanghimatuod sa atubangan sa mga grupo sa phenyl nga gidala sa usa ka susama nga sample hydroxybenzene.

Ang tube sa paghimo 2 ml sa mga lasaw phenol, unya hinay-hinay nga sa daplin sa kuta, ang gidugang 2 ml sa tingub nitric acid. Ang solusyon nga gipailalom sa pagpainit, diin kini mahimong yellow. Kini nga reaksyon mao ang kalidad sa sa atubangan sa benzene singsing.

Process hydroxybenzene nitrated sa nitric acid gisundan sa pagporma sa usa ka sinagol nga p-nitrophenol ug o-nitrophenol sa usa ka porsiyento sa 15 ngadto sa 35.

Ang pagtandi test sa gelatin

Aron pamatud-an nga ksantoproteinovaya reaksyon sa protina nagpadayag sa usa ka amino acid ug humot nga gambalay, sa paggamit sa mga protina nga wala sa usa ka phenolic grupo.

Sa usa ka limpyo nga tube gihimo sa 1% gelatin solusyon sa usa ka kantidad sa 2 ml. Sa niini nga gidugang sa mga 9 tulo sa tingub nitric acid. Ang resulta sagol nga mao ang naandan nga kainit. Ang solusyon wala kolor nga sa yellow, nga nagpamatuod sa pagkawala sa amino mga asido uban sa usa ka humot nga istruktura. Usahay adunay usa ka gamay nga yellowing sa sa palibot tungod sa presensya sa protina impurities.

kemikal nga mga pagbalanse

Sa duha ka mga lakang reaksiyon midagan ksantoproteinovaya protina. Pormula sa unang stage nitration proseso naghulagway amino mga molekula acid sa paggamit sa tingub nitric acid.

Usa ka panig-ingnan mao ang taoran, aputan sa nitro grupo sa tyrosine sa pagporma sa nitrotyrosine ug dinitrotirozina. Sa unang kaso sa benzene singsing ang gilakip sa usa ka WALAY ₂ -radical, ug ang ikaduha compound adunay duha ka hydrogen atomo nga gipulihan sa DILI _2. Kemikal nga pormula ksantoproteinovaya tyrosine reaksyon nga gihawasan sa reaksyon uban sa nitriko acid sa pagporma nitrotyrosine molekula.

Nitration proseso inubanan sa transisyon walay-kolor Koloranan sa yellow nga tono. Sa pagtuman niini nga reaksyon sa mga protina nga naglangkob sa mga amino acid residues phenylalanine o tryptophan, ug kolor sa mga kausaban nga solusyon.

Ang ikaduhang lakang mao ang reaksiyon produkto sa nitration sa tyrosine molekula, ilabi nitrotyrosine, uban sa ammonium o sodium hydroxide. Ang resulta mao ang usa ka sodium o ammonium asin diin ang yellow-orange ang kolor. Ang maong reaksiyon sa usa ka may kalabutan sa sa posibilidad sa nitrotyrosine molekula mobalhin sa quinoid porma. Human sa Salt umol niini nitronic acid, nga adunay usa ka quinone sistema sa balayon double talikala.

Mao kini ang matapos ksantoproteinovaya reaksyon sa protina. talaid Ang gipresentar sa ibabaw ikaduha nga lakang.

resulta

Atol sa pagtuki sa mga pluwido nga anaa sa tulo ka mga tubo, ang paghisgot nga solusyon nga lasaw uban sa phenol. Mga butang uban sa usa ka benzene singsing sa paghatag qualitative reaksyon uban sa nitriko acid. Ingon sa usa ka resulta, kini usab sa kolor sa solusyon.

Ingon sa nailhan, gelatin naglangkob sa usa ka hydrolyzed matang sa collagen. protina Ang wala naglangkob sa mga humot nga gambalay sa amino mga asido. Walay kausaban sa kolor sa medium pinaagi sa reaksyon sa usa ka acid.

Sa ikatulo nga pagsulay tube adunay usa ka positibo nga reaksyon sa mga protina ksantoproteinovaya. Panapos mahimong madani sa mosunod: sa tanan nga mga protina ug humot nga gambalay, kon kini mahimo nga usa ka phenyl grupo o sa usa ka indole singsing, nga gihatag sa kausaban sa kolor sa mga solusyon. Kini mao ang tungod sa sa pagporma sa nitro compounds uban sa usa ka yellow nga kolor.

Pagtuman sa usa ka kolor reaksyon nagpamatuod sa atubangan sa mga nagkalain-laing mga istruktura kemikal sa amino mga asido ug mga protina. PANIG-INGNAN gelatin nagpakita nga komposisyon niini naglakip sa aminocarboxylic acid nga walay phenyl grupo o sa usa ka cyclic nga gambalay.

Uban sa ksantoproteinovaya reaksiyon mahimong gipatin-aw pinaagi sa yellowing sa sa mga panit sa diha nga apply ngadto sa kini nga usa ka lig-on nga nitric acid. Ang sama nga kolor mahimong frothy gatas sa panahon sa iyang susama nga pagtuki.

Sa clinical laboratory praktis niini nga kolor sample wala gigamit alang sa detection sa protina sa ihi. Kini mao ang tungod sa yellow nga kolor sa ihi sa iyang kaugalingon.

Ksantoproteinovaya reaksyon nahimong mas gigamit alang sa quantification sa amino mga asido sama sa tryptophan ug tyrosine, ingon nga bahin sa nagkalain-laing mga protina.