PCR pagtuki: unsa man kini? Sa unsa nga paagi sa pagkuha sa PCR pagtuki

Kini dili mao sa dugay na og usa ka kasaligan, kaayo sensitibo ug paspas nga pamaagi alang sa panghiling sa nagkalain-laing mga makatakod nga mga sakit sa mga tawo. Ang maong pamaagi mao ang gitawag nga "PCR pagtuki". Unsa kini, unsa ang iyang diwa, unsa ang iyang mahimo sa pag-ila microorganisms ug sa unsa nga paagi sa pagkuha niini, kita paghulagway sa niini nga artikulo.

Kasaysayan sa pagdiskobre

Imbento sa polymerase kadena nga reaksyon (PCR) mao ang usa ka Amerikano nga siyentista Sila si Keri Myullis sa 1983. Sa sinugdan, ang mga patente nga pamaagi sa diagnosis sa "Cetus Corporation," diin siya nagtrabaho ug magbubuhat niini. Apan sa 1992 ang tanan nga mga katungod ug mga patents gipamaligya ngadto sa mga panon sa "Hoffman-La Roche." Human nga, kini mibalik nga susama nga mga pagtuon nga gidala sa gawas sa susama ug report sa ubang mga biologo sa US, sama sa Elis Chen, nga si David Edgar, Juan rre. Sa 1980 siya nga moapil diha sa niini nga isyu, ug ang mga Sobyet siyentipiko A. Slyusarenko A. Kaledin ug S. Gorodetsky. Busa, sa pagtino sa bugtong tag-iya sa copyright wala mahimo. Daghan ang talagsaong biochemists nakatampo sa sa pagpalambo sa mga pamaagi sa polymerase reaksyon ug CERN patente sa ilang mga inobasyon. Sa niini nga punto pagtuki sa PCR ang gidala sa gawas sa tibuok labi himan laboratoryo.

KATINGBANAN PCR diagnostic

PCR pagtuki: unsa kini ug sa unsang paagi kini sa trabaho? Ang diwa sa pamaagi sa mga bakak sa mga kamatuoran nga pinaagi sa paggamit sa usa ka espesyal nga enzyme DNA polymerase sa vitro sa pagdugang sa gidaghanon sa piho nga microbial nga palibot. Sa pagbuhat niini balik-balik nga modaghan anaa sa DNA nga materyal. Busa, sa atubangan sa usa ka pathogen sa usa ka sample sa kantidad nga misaka sa gasto sa biochemical laboratory manipulasyon, ug bakterya dili lisud nga sa pag-ila sa mikroskopyo.

Sa unsang paagi nga ang pagtuon sa mga materyal nga?

Aron sa pagdala sa pagtuki gikinahanglan:

• Ang plantilya DNA;
• primers materyal nga nga nagdugtong kinatumyan sa tipik;
• thermostable DNA polymerase enzyme;
• kemikal, sa pagsiguro sa husto nga operasyon sa enzymes;
• buffer solusyon ang gikinahanglan alang sa pagmugna sa angay nga kahimtang alang sa pagtubo ug paglambo sa DNA nga materyal.

Sa paghimo sa PCR operate 25-30 misubli nga naglangkob sa tulo ka mga lakang: denaturation, annealing ug elongation.

Sa pag-analisar polimezarnoy kadena nga reaksyon sa paggamit sa usa ka espesyal nga lalang - cycler. Modernong ekipo nagtugot kaninyo sa pag-instalar sa gikinahanglan nga pagpainit ug makapabugnaw tubo nga programa sa pagwagtang sa mga sayop sa panahon sa dayagnosis.

Diin sa paggamit sa panghiling?

Polimezarnoy pamaagi nga reaksyon nga gigamit diha sa nagkalain-laing mga kaumahan sa medisina:

• Forensic nga paggamit niini sa pag-ila sa mga gene nga materyal, sama sa buhok, laway o dugo;
• PCR pagtuki sa dugo makatabang sa genotyping, pananglitan alang sa detection sa tagsa-tagsa genetic nga gitanom tubag sa usa ka piho nga drug;
• pinaagi sa usa ka pamaagi nga gibutang relasyon sa pamilya tali sa mga tawo;
• labing gipangita-PCR pamaagi nahimong sa medikal nga panghiling alang sa determinasyon sa mga nagkalain-laing mga makatakod nga mga sakit.

Unsa nga mga impeksiyon gipadayag PCR?

Busa, ang tambal dugay na nga malampuson nga gigamit PCR pagtuki. Unsa kini, na kita nakat-onan. Ug ang uban kagaw mahimong nakadipara uban niini? PCR nadayagnos mosunod nga mga impeksiyon :

• hepatitis A, B, C;
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• chlamy- dia;
• mycoplasmosis;
• bakterya vaginosis;
• makatakod nga mononucleosis;
• TRICHOMONIASIS;
• HPV impeksyon;
• tuberculosis;
• herpes impeksyon sa 1st ug 2nd matang;
• Helicobacter pylori impeksyon;
• cytomegalovirus;
• dipterya;
• salmonellosis;
• impeksyon sa HIV.

Usab, PCR mga paagi nga gigamit sa pagdayagnos sa kanser.

bentaha sa pamaagi

Diagnostic PCR adunay pipila ka mga bentaha:

1. Hataas sensitivity. Bisan sa pipila lamang ka mga DNA molekula mikroorganismo nga PCR pagtuki motino sa atubangan sa impeksyon. Kini makatabang sa pamaagi alang sa laygay nga ug tinago nga mga sakit nga nahitabo. Kasagaran sa maong mga kaso, ang mga mikroorganismo nga mao ang wala matikad sa ubang mga paagi.
2. Aron sa pag-imbestigar sa bisan unsa nga angay nga mga materyal, sama sa laway, sa dugo, sekswal nga pagpili, buhok, epithelial cells. Ang labing komon nga mao ang usa ka pagsulay sa dugo ug urogenital swab PCR.

3. Wala magkinahanglan og usa ka mitunol sa nagtubo nga mga kultura. Ang automated proseso sa diagnostics nagtugot sa pag-angkon resulta sa usa ka pagtuon human sa 4-5 ka oras.
4. pamaagi mao ang hapit sa bug-os tinuod. Nahitala lamang inusara kaso sa bakak nga-negatibo nga resulta.
5. Abilidad sa pag-ila sa pipila ka mga matang sa pathogens sa usa ka sample nga materyal. Kini dili lamang paspas nga sa proseso sa panghiling sa mga sakit, apan usab sa kamahinungdanon pagmobu, pagminus sa materyal nga mga gasto. Kasagaran, ang mga doktor mosugyot usa ka komprehensibo nga pagtuki sa PCR. Price survey, nga naglangkob sa pagtino sa unom ka pathogens, mao ang mahitungod sa 1,500 ruble.

Rekomendasyon sa pagpangandam alang sa pagtuki

Ang mga resulta nga mahimong balido ang PCR mga pagtuon kinahanglan nga pagasulayan, sa pagsunod sa mga rekomendasyon sa mga pasiunang pagpangandam alang sa panghiling:

1. Sa wala pa delivery sa laway kinahanglan paglikay sa pagkaon ug drug alang sa 4 ka oras sa wala pa sampling sa materyal. Diha-diha dayon sa atubangan sa pamaagi, rinse sa imong baba uban sa linuto nga tubig.
2. Ang mga lagda sa itaas kinahanglan magiyahan ug sa diha nga ang pagkuha sa sampol gikan sa sulod sa aping. Human sa rinsing girekomendar aron sa pagdala sa usa ka kahayag pagmasahe sa panit sa pagpagawas prostatic secretions.
3. Ihi sa kasagaran nga nakolekta sa balay. Sa pagbuhat niini, ikaw kinahanglan nga sa pagpahigayon og usa ka bug-os nga kasilyas sa mga kinatawo. Sa usa ka sterile plastik nga sudlanan nga gikinahanglan sa pagkolekta 50-60 ml sa ihi. Kini girekomendar alang sa mga babaye aron sa sal-ot sa tampon ngadto sa vagina, ug ang mga tawo kutob sa mahimo aron sa pagbitad sa mga panit pilo aron sa pagsiguro sa kaputli sa mga materyal nga. Dili kamo mahimong mogamit sa mga materyal nga sa panahon sa menses.
4. Kay delivery sa sperm sa paglikay sa pakighilawas sulod sa 3 ka adlaw sa wala pa ang koleksyon sa materyal nga. Usab, ang mga doktor gitambagan sa pagbiya sa sa paggamit sa mga sauna ug sa mainit nga si Bath, alkohol ug halang nga mga pagkaon. Alang sa 3 ka oras sa wala pa sa pagtuki mao ang gikinahanglan aron sa paglikay sa mangihi.
5. Sa pag-agi sa mga urogenital smear, alang sa panig-ingnan, kon ang pagtuki sa usa ka chlamy- dia PCR, mga babaye ug mga tawo girekomendar nga ang sekswal nga pahulay alang sa 3 ka adlaw. 2 ka semana sa wala pa ang pagtuki dili mahimo sa antibiotics. Kay sa usa ka semana nga kamo kinahanglan nga mohunong sa paggamit sa suod nga mga gel, lana, sa vaginal suppositories, douching. 3 ka oras sa wala pa ang pagtuon kinahanglan maglikay sa mangihi. Panahon sa pagregla koral nga materyal dili gidala sa gawas, lamang sa 3 ka adlaw human sa pagtapos sa spotting mahimo urogenital smear.

PCR sa panahon sa pagmabdos

Ang naghulat nga panahon alang sa usa ka bata, daghan makatakod nga mga sakit, nga gipasa sa sekso nga mga sakit, mao ang hilabihan delikado alang sa normal nga fetal development. STD mahimong makamugna intrauterine kalamboan, pagkakuha sa gisabak o ahat nga pagpanganak, congenital malformations sa bata. Busa, kini mao ang importante sa pagkuha sa sayo sa pagmabdos screening PCR. Ipasa pagtuki mao ang gikinahanglan sa diha nga ang pagparehistro - sa 12 ka semana.

Koral nga materyal gikan sa cervical kanal uban sa usa ka espesyal nga brush. Ang pamaagi mao ang walay sakit ug naghatag walay kakuyaw ngadto sa bata. Kasagaran sa panahon sa pagmabdos analisar sa Chlamydia PCR pamaagi, ingon man usab sa ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, papillomavirus. Ang maong pagsusi complex nga gitawag PCR 6.

PCR alang sa panghiling sa HIV

Tungod sa sa kamatuoran nga ang mga pamaagi sa polymerase kadena nga reaksyon mao ang kaayo sensitibo sa mga kausaban diha sa lawas ug sa mga kahimtang sa panghiling, daghang mga butang makaapektar sa sangpotanan. Busa PCR analysis alang sa HIV infection dili sa usa ka kasaligan nga pamaagi, ang efficiency - 96-98%. Ang nahibilin nga 2-4% sa pagsulay naghatag bakak nga positibo nga mga resulta.

Apan sa pipila ka mga sitwasyon nga walay PCR diagnosis sa HIV dili makahimo. Kasagaran, kini gidala sa mga tawo sa bakak nga-negatibo nga ELISA. Kini nga mga numero nagpakita nga ang tawo wala pa mamugna mga antibody ngadto sa virus ug dili mahimong nakadipara nga dili sa pagdugang sa gidaghanon sa mga multiple. Nga kini mahimong makab-ot pinaagi sa pagpahigayon sa usa ka sa dugo test PCR pamaagi.

Usab nga gikinahanglan mao ang usa ka panghiling sa mga anak sa unang tuig sa kinabuhi, nga natawo sa HIV-positibo nga mga inahan. pamaagi mao ang bugtong paagi sa reliably pagtino sa kahimtang sa mga bata.

PCR alang sa panghiling sa hepatitis

Polymerase pamaagi nga reaksyon nagtugot detection sa DNA sa virus sa hepatitis A, B, C, maayo sa atubangan sa pagporma sa mga antibody ngadto sa impeksyon o simtoma pagsugod. Ilabi epektibo ang PCR pagtuki sa hepatitis C, sukad sa 85% sa maong sakit mao ang mga asymptomatic ug walay tukma sa panahon pagtambal mahimong laygay.

Tukma sa panahon nga detection sa pathogen makatabang sa paglikay sa komplikasyon ug long-term nga pagtambal.

Integrated PCR screening

Comprehensive PCR Analysis: unsa man kini? Kini nga screening pamaagi polimezarnoy kadena nga reaksyon nga naglakip sa pagtino dungan sa pipila sa henero nga impeksyon: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes 1st ug 2nd matang, gonorrhea papillomavirus. Ang bili sa niini nga panghiling molakip gikan sa 2,000 ngadto sa 3,500 ruble. depende sa clinic, mga materyales ug mga ekipo, ingon man sa matang sa pagtuki: qualitative o quantitative. Unsa ang gikinahanglan sa imong kahimtang - sa doktor mohukom. Sa pipila ka mga kaso, ikaw lang yano nga makamatikod sa atubangan sa mga pathogen sa uban, sama sa HIV, ang importante nga papel sa quantitative titer. gitawag nga "PCR pagtuki sa 12" sa pagdayagnos sa tanan nga mga sa ibabaw pathogens examination sa.

Pagsabut sa mga resulta sa pagtuki

Transcription PCR pagtuki mao ang prangka. Adunay 2 lang index scale - ". Negatibo nga" "positibo" ug Sa detection sa pathogen mahimo mga doktor sa 99% nga pagsalig -th pagmatuod sa atubangan sa mga sakit ug sa pagsugod sa pagtambal sa mga pasyente. Sa quantitative nga pamaagi sa pagtino sa impeksiyon sa usa ka katugbang nga kolum index gidaghanon sa mga nakadipara bakterya nga bungat. Lamang sa usa ka doktor nga mahimo pagtino sa gidak-on sa sakit ug sa prescribe sa gikinahanglan nga pagtambal.

Sa pipila ka mga kaso, alang sa panig-ingnan sa pagtino sa impeksiyon sa HIV pinaagi sa PCR, uban sa usa ka negatibo nga resulta, adunay usa ka panginahanglan alang sa dugang nga mga survey aron sa pagmatuod sa niini nga mga numero.

Diin sa pag-na gisulayan?

Diin moagi-PCR pagtuki sa publiko klinika o sa usa ka pribado nga laboratory? Ikasubo, sa municipal medikal nga mga institusyon mga ekipo ug mga pamaagi sagad madaan. Busa kini mao ang mas maayo sa paghatag sa pagpalabi sa mga pribadong laboratoryo sa modernong ekipo ug sa kaayo sa mga kwalipikado nga mga kawani sa. Dugang pa, sa usa ka pribado nga klinika kamo sa mga resulta sa daghan nga mas paspas.

Sa Moscow, daghang mga pribado nga laboratoryo sa paghalad sa PCR analysis alang sa mga nagkalain-laing mga impeksiyon. Pananglitan, sa maong klinika nga "Vita", "Integrated Clinic," "Malipayon nga Pamilya", "uro-Pro", gidala sa gawas PCR pagtuki. Survey sa presyo mao ang 200 ruble. alang sa pagtino sa usa ka pathogen.

Kini mahimong nakahinapos nga ang panghiling sa makatakod nga mga sakit pinaagi sa PCR diha sa kadaghanan sa mga kaso mao ang usa ka buhi ug kasaligan nga paagi sa pagmatikod sa pathogen sa lawas sa unang mga hugna sa impeksyon. Bisan pa niana, sa pipila ka mga kaso, sa pagpili sa ubang mga pamaagi sa diagnosis. Tinoa ang panginahanglan alang sa maong usa ka pagtuon lamang nga usa ka specialist. PCR pagtuki decryption nagkinahanglan usab sa usa ka propesyonal nga paagi. Sunda ang tambag sa imong doktor ug dili mohatag sa ilang kaugalingon nga mga pagsulay, nga dili gikinahanglan.